1. 培养基 1.1 种子培养基 蛋白胨1 %，酵母浸出物0. 5 %，氯化钠1 % ，自然pH。 1.2 基础发酵培养基 蔗糖1 %，蛋白胨1 %，磷酸氢二钠0. 2 %，磷酸二氢钠0. 2 %， pH 7. 0。 1.3 主要试剂 蔗糖、葡萄糖、淀粉、玉米淀粉、麦芽糖、酵母浸出物、胰蛋白胨、牛肉
1. 培养基
1.1 种子培养基 蛋白胨1 %，酵母浸出物0. 5 %，氯化钠1 % ，自然pH。
1.2 基础发酵培养基 蔗糖1 %，蛋白胨1 %，磷酸氢二钠0. 2 %，磷酸二氢钠0. 2 %， pH 7. 0。
1.3 主要试剂
蔗糖、葡萄糖、淀粉、玉米淀粉、麦芽糖、酵母浸出物、胰蛋白胨、牛肉膏、尿素、氯化铵、硫酸锰、硫酸镁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硫酸亚铁、氯化钠和氯化钙。
1.4 仪器设备
控温摇床、高压蒸气灭菌锅、电子天平、pH 测定仪、无菌操作台和紫外分光光度计。
2.方法
2. 1培养方法
2. 1. 1菌种活化
将保存的菌种转接到斜面培养基，37 ℃培养24 h，备用。
2. 1. 2种子液的制备
取一环活化的菌种，接入装量为50 mL种子培养基的250mL三角瓶中，37℃，180 r/ min 培养18 h。
2. 1. 3摇瓶培养
分别取1 mL 种子液，接入盛有50 mL 发酵培养基的200 mL三角瓶中(接种量为2 % ， V/ V。置摇床中，30 ℃振荡培养12 h，转速为160 r/ min)
3. 培养条件
3.1碳源
以葡萄糖、蔗糖和麦芽糖为碳源时枯草芽孢杆菌的生长明显优于可溶性淀粉和玉米淀粉。最佳碳源是葡萄糖，其次是蔗糖。
3.2氮源
氮源为有机氮源时枯草芽孢杆菌的生长明显优于无机氮源。最适氮源是酵母
浸出物，从发酵成本考虑，酵母浸出物、胰蛋白胨及氯化铵组成的复合氮源较合适。
4.发酵条件
4.1生长曲线
接种12 h后细菌数量开始减少，枯草芽孢杆菌进入生长衰亡期。因此，采用8～12 h 时的菌液作为菌种较合适，此时枯草芽孢杆菌为对数生长末期，既可保持高的细胞活力，又可获得尽可能多的细胞数。
4.2 初始PH
在初始pH 5. 5～8范围内枯草芽孢杆菌均可良好生长，pH 为6. 0 时生长最好，说明枯草芽孢杆菌对pH 的适应性较宽，但随pH 的增大，活菌数呈下降趋势。
4.3温度
枯草芽孢杆菌在25～40℃均可良好生长，其生长的最适温度为35℃。
4.4装液量及接种量
枯草芽孢杆菌为需养菌，在生长过程中需要大量的氧气，装液量不可过多，培养液与容器体积比可设定为2:25；接种量3 % (V/ V) 较适合其生长。
5.干燥方式
采用喷雾干燥和低温冷冻干燥。低温冷冻干燥更利于芽孢的形成，但其操作复杂、成本高，不利于规模化工业生产。而喷雾干燥同样可产生高芽孢率，且成本相对低，更适合工业生产。
群林枯草芽孢杆菌—致力打造国内最好用的枯草芽孢杆菌：http://www.bhqlsw.com/a/kucaoyabaoganjun/2012/0822/401.html
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